IgM类单克隆抗体纯化试剂盒使用说明书
试剂原理：
本试剂盒利用不同类别免疫球蛋白结构特性，通过大量实验分析验证而得到的一个与传统纯化完全不同的精细的具有高活性、高产率、快速以及良好重复性的单克隆抗体的纯化方法，本试剂盒所用材料对人体没有损害，安全环保。
试剂特点：
本试剂盒特点在于纯化操作的简单化、所得抗体的高活性和高纯度。实验表明，本试剂盒可以得到95%左右纯度的抗体；并且由于配方考究，抗体在纯化过程中几乎没有损伤，完全保持应有的活性，实际应用极好。
适用范围：
本试剂盒仅适用于小鼠IgM类单克隆抗体腹水的纯化，不能用于其它Ig类或亚类单克隆抗体腹水的纯化实验，如需要可选择立可纯系列其它货号的纯化试剂，它能为您带来满意结果。
试剂组成：
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试剂名称
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数量
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试剂名称
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数量
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纯化液A
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65ml
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30X浓缩透析液
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150ml
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纯化液B
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50mL
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透析袋
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1根
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纯化液C
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30mL
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说明书
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1份
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纯化液D
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40mL
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空白不干胶标签
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2片
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纯化步骤：
1、将单克隆抗体腹水从冰箱中取出，室温避光放置15分钟，然
后用凉水边冲边摇匀快速解冻。
2、将化开的单克隆抗体腹水12000RPM 4-37℃离心10-20分钟。
3、先吸弃最上面浮沫和油脂，然后将上清转出到另一个干净容器或离心管；按每1毫升单克隆抗体腹水加入纯化液A 1.25毫升，室温避光倒转20分。
4、8000RPM 4-37℃离心10-20分钟，沉淀用纯化液B溶解到原单克隆抗体腹水1/2体积；再按每毫升加入纯化液C 1.1毫升，室温避光倒转10分钟。
5、8000RPM 4-37℃离心10-20分钟，弃沉淀收集上清；每1.05毫升上清液加纯化液D 1.25毫升，室温避光倒转20分钟。
6、8000RPM 4-37℃离心10-20分钟，收集沉淀用纯化液B收集溶解沉淀到原单克隆抗体腹水体积的1/2。
7、透析袋用PBST浸泡3-5分钟，然后用手揉捏数次，自来水冲净后接纯水冲洗干净，将纯化好的抗体放入用透析夹或绳扎紧。
8、透析液用纯水稀释30倍，将要透析的抗体袋子放入。抗体体积：透析液体积=1:50，4℃搅拌透析每次0.5-1小时，共3-4次。
9、8000RPM 4-37℃离心10-20分钟，收集上清测蛋白浓度并调控在5mg/ml左右最后加10/万NaN3防腐并除菌过滤4℃备用。
注意事项：
1、溶血和腐败的腹水不得用于纯化（血性腹水离心后除去红细胞等可正常纯化）。
2、离心温度最好不要超过37℃。
3、操作和量取试剂要细致精准。
4、不搅拌透析每次时间不得低于2小时
