冻存的细胞该如何开始培养？
⑴将一管细胞从液氮罐中取出，注意保护手和眼睛。
⑵用10秒钟时间将小管的盖子拧松1/4以去除残留在螺纹处的液氮，然后将盖子盖紧。
⑶将小管放入37℃水浴中，轻轻握住并旋转，直到管内物体完全融化。
⑷将小管立即从水浴中拿出，擦干，转入无菌环境。
⑸用70％的酒精冲洗小管，然后擦去多余酒精。
⑹打开盖子，注意手指不要碰到里面的螺纹。用1ml离心管离心内容物。
⑺平衡管内物，用多聚赖氨酸包被培养瓶(多数细胞用T-75的培养瓶)。多数细胞类型推荐接种密度为每平方厘米5000细胞。
⑻盖好盖子，轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。
⑼将培养瓶放放培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)
⑽植入培养后第6-16小时更换一次培养基以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。
